TG003
mRNA synthesis
In vitro transcription of capped mRNA with modified nucleotides and Poly(A) tail
Tyramide Signal Amplification (TSA)
TSA (Tyramide Signal Amplification), used for signal amplification of ISH, IHC and IC etc.
Phos Binding Reagent Acrylamide
Separation of phosphorylated and non-phosphorylated proteins without phospho-specific antibody
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
A convenient and sensitive way for cell proliferation assay and cytotoxicity assay
SYBR Safe DNA Gel Stain
Safe and sensitive stain for visualization of DNA or RNA in agarose or acrylamide gels.
Inhibitor Cocktails
Protect the integrity of proteins from multiple proteases and phosphatases for different applications.
TG003是有效的Clk家族激酶选择性抑制剂,对mClk4\mClk1\mClk2和mClk3的IC50值分别为15 nM\20 nM\200 nM和>10 μM[1].此外,TG003也是酪蛋白激酶1(CK1)抑制剂[2].
Cdc2样激酶(Clks)家族包括Clk1\Clk2\Clk3和Clk4,在mRNA剪接位点选择中起着重要作用.CLKS使富含丝氨酸/精氨酸的蛋白(参与前体mRNA加工)磷酸化并将其释放到核质中.
TG003是一种有效的和选择性的Clk家族激酶抑制剂.TG003与ATP竞争Clk1/Sty,其Ki值为0.01 μM.在HeLa细胞的胞浆提取物(S100)中,TG003抑制Clk1/Sty介导的SF2/ASF磷酸化,而其在可变剪接中起着重要作用.此外,补充rSF2/ASF后,TG003抑制β珠蛋白前体mRNA的剪接.在过表达HA-Clk1/Sty的HeLa细胞中,TG003(10 μM)可逆性地抑制SR蛋白磷酸化,使HA-Clk1/Sty定位于核斑点[1].
在小鼠中,TG003抑制Clk1/Sty诱导的剪接位点选择的改变,并影响内源基因的可变剪接.在非洲爪蟾胚胎中,xClk激酶过表达引起背外胚层与中胚层的形态异常,而TG003(10 μM)可以逆转上述作用[1].
参考文献：
[1]. Muraki M, Ohkawara B, Hosoya T, et al. Manipulation of alternative splicing by a newly developed inhibitor of Clks. J Biol Chem, 2004, 279(23): 24246-24254.
[2]. Kurihara T, Sakurai E, Toyomoto M, et al. Alleviation of behavioral hypersensitivity in mouse models of inflammatory pain with two structurally different casein kinase 1 (CK1) inhibitors. Mol Pain, 2014, 10: 17.
| Physical Appearance | A solid |
| Storage | Store at -20°C |
| M.Wt | 249.33 |
| Cas No. | 300801-52-9 |
| Formula | C13H15NO2S |
| Solubility | insoluble in H2O; ≥12.45 mg/mL in DMSO; ≥14.67 mg/mL in EtOH with ultrasonic |
| Chemical Name | (1Z)-1-(3-ethyl-5-methoxy-1,3-benzothiazol-2-ylidene)propan-2-one |
| SDF | Download SDF |
| Canonical SMILES | CCN1C2=C(C=CC(=C2)OC)SC1=CC(=O)C |
| 运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 一般建议 | 不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。 |
| 细胞实验 [1]: | |
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细胞系 |
HeLa细胞 |
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溶解方法 |
在DMSO中的溶解度>12.5mg/mL。为了获得更高的浓度，可以将离心管在37℃加热10分钟和/或在超声波浴中震荡一段时间。原液可以在-20℃以下储存几个月 |
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反应时间 |
2μl的10 mM TG003（溶解于Me2SO），实验终浓度为10μM，3天 |
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应用 |
TG003对Clk1（Cdc2样激酶1）的活性有着强效的抑制性。TG003能够通过抑制Clk介导的磷酸化，抑制SF2（剪切因子2）依赖性的对β球蛋白前体mRNA的体外剪切。该药物也能抑制细胞中丝氨酸/精氨酸富余蛋白的磷酸化，核小点的解离， 以及Clk1依赖的选择性剪切。 |
| 动物实验[2]: | |
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动物模型 |
七周龄，雄性Jcl:TCR小鼠 |
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剂量 |
TG003溶解于5% DMSO, 5% 聚乙二醇硬脂酸酯, 9% 吐温-80, 和81% 生理盐水的混合溶液中，30mg/kg，皮下注射 |
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应用 |
TG003作为CLK1的抑制剂，在小鼠中能够作为外显子跳读治疗的剪接修饰化合物。TG003能够促进跳过肌萎缩蛋白的外显子31中c.4303G > T突变。 |
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注意事项 |
请测试所有化合物在室内的溶解度，实际溶解度和理论值可能略有不同。这是由实验系统的误差引起的，属于正常现象。 |
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References: [1]. Muraki M, Ohkawara B, et al. Manipulation of alternative splicing by a newly developed inhibitor of Clks. J Biol Chem, 2004, 279(23): 24246-24254. [2]. Sako Y1, Ninomiya K1, et al, Development of an orally available inhibitor of CLK1 for skipping a mutated dystrophin exon in Duchenne muscular dystrophy. Sci Rep. 2017 May 30;7:46126. doi: 10.1038/srep46126. | |
化学结构
